熒光PCR凍干-甜菜堿

甜菜堿是一種生物堿，具有強(qiáng)烈的吸濕性能，所以在制作工藝中經(jīng)常會使用抗結(jié)塊劑處理，其分子結(jié)構(gòu)、應(yīng)用效果與天然甜菜堿無明顯差別，屬于化學(xué)合成的天然物等同物。可廣泛應(yīng)用于化工、飼料、食品、印染、日化、醫(yī)藥等領(lǐng)域。下面介紹下甜菜堿在PCR的主要應(yīng)用1.可應(yīng)用于DNA的測序反應(yīng)實(shí)驗(yàn)中，提升含有重復(fù)序列(連續(xù)多個A或T)的測序準(zhǔn)確性。2.提升長片段DNA的PCR成功率。3. 適用于復(fù)雜模板的PCR擴(kuò)增，如高GC含量DNA的PCR擴(kuò)增。4. 適用于某些粗糙模板的直接測序，如經(jīng)NaOH溶液裂解的細(xì)胞裂解物。5. 適用于較長cDNA的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。6. 作為LAMP環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增的添加劑。熒光PCR凍干體系優(yōu)化方法：沒有經(jīng)驗(yàn)采用單一因素法，有一定經(jīng)驗(yàn)的采用多因素法。單一因素法篩選出保護(hù)效果比較好的保護(hù)劑，再將保護(hù)效果好的保護(hù)劑進(jìn)行組合，產(chǎn)生終配方。因此，初步篩選采用單因素法，進(jìn)一步篩選采用多因素法。